Obsah
- Pokyny
- Příprava bramborového extraktu
- Příprava směsi
- Sterilizace
- Nalije se směs
- Jak
- Oznámení
- Co potřebujete
Agar dextróza brambor (BDA) je dobré polotuhé médium pro všeobecné použití používané k tvorbě hub. To je také často používáno izolovat, růst a udržovat druhy hub ve formaci. Připravené Petriho misky nebo zkumavky obsahující BDA mohou být zakoupeny, nebo BDA lze rychle vyrobit s použitím komerční premixu. Není však těžké vytvořit jednoduchou a účinnou verzi s nízkými náklady.
Pokyny
-
Brambory dejte na pánev s asi 1,2 litry vody z vodovodu a hodinu vařte na sporáku.
-
Vyjměte pánev z ohně a ochlaďte kapalinu, dokud nebude možné s ní pohodlně manipulovat (asi deset minut).
-
Kapalný extrakt brambor se nalije přes filtr nebo gázu a zachytí se do jiné nádoby.
Příprava bramborového extraktu
-
Přidá se dextróza a agar do čtvrtiny vody bramborového extraktu.
-
Otestujte pH roztoku papírem s testerem pH nebo pH metrem.
-
Pokud je hodnota pH nad 6,5, snižte ji přidáním jedné kapky roztoku kyseliny chlorovodíkové pokaždé a provedením dalšího testu.
-
Pokud je hodnota pH nižší než 6, upraví se přidáním jedné kapky roztoku hydroxidu sodného najednou a provedením nového testu.
Příprava směsi
-
Dobře promíchejte a rozdělte na menší dávky po 250 ml. Nalijte do čtyř 500 ml lahviček (každá lahvička musí být napůl plná, aby nedošlo k varu).
-
Každá lahvička se nabíjí kusem volně složené hliníkové fólie, aby nedošlo k jejímu pádu, ale nevytvářejte ani úplné utěsnění.
-
Sklenice vložte do tlakového hrnce.
-
Tlakový hrnec používejte podle pokynů výrobce pro sterilizaci BDA při 121 ° C při 15 psi po dobu 15 minut.
-
Vypněte tlakový hrnec a nechte jej vrátit se na atmosférický tlak, poté vyjměte lahvičky a nechte vychladnout, dokud se s nimi nebude manipulovat.
Sterilizace
-
Zarovnejte Petriho misky na rovném povrchu.
-
Jakmile byly lahvičky ochlazeny na manipulační teplotu, ale předtím, než médium začne tuhnout, držte lahvičku jednou rukou a druhou rukou odstraňte kryt fólie.
-
Pro každou Petriho misku sejměte víčko jednou rukou, rychle napijte polovinu tekutým BDA a nasaďte víko.
-
Opakujte krok 3 výše, dokud nejsou naplněny všechny Petriho misky.
-
Pokud zbývá nějaký BDA, vyjměte láhev s víčkem původní fólie, nechte vychladnout a ztuhnout, utáhněte hliníkové víčko a uložte jej do chladničky.
Nalije se směs
Jak
- Většina hub roste dobře za mírně kyselých podmínek, takže konečná hodnota pH by měla být mezi 6 a 6,5, i když může být upravena na jakékoli pH požadované pro konkrétní druh.
- Nechte kryty Petriho misek otevřít jen natolik, aby se směs mohla nalít a aby byla co nejrychleji zakryta.
- To vyžaduje praxi získat rychlost a efektivitu v rozlití agaru v Petriho miskách.
- Po ochlazení a ztuhnutí lze nádobí BDA zabalit do plastu a uskladnit v chladničce několik měsíců.
- Většina vody z vodovodu obsahuje minerály prospěšné pro růst hub, ale pokud má místní voda extrémní koncentrace minerálů nebo velmi vysoké nebo nízké pH, nahraďte ji destilovanou vodou.
Oznámení
- Dodržujte všechny provozní a bezpečnostní pokyny pro použití tlakového hrnce.
- Při sterilizaci tlakového hrnce ponechte uzávěry lahví volné, aby nedošlo k přetlaku.
- Při manipulaci s horkými nádobami používejte rukavice odolné vůči teplu.
- Při manipulaci s tlakovým hrncem při odstraňování sterilního BDA a během nalévání noste ochranné brýle.
Co potřebujete
- 300 g brambor oloupaných a krájených
- Pan
- Kuchyňské sítko
- PH tester nebo pH metr
- 1 mol kyseliny chlorovodíkové
- 1 molární hydroxid sodný
- 4 500 ml lahviček ze skleněných lahviček Ehrlenmayer (nebo jiných nádob s úzkým hrdlem) t
- 10 g dextrózového (glukózového) prášku
- 20 g agaru
- Hliníková fólie
- Tlakový hrnec
- Sterilní Petriho misky